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中国美容医学2007年第4期  文章正文

DOC-1基因的原核表达载体构建及其重组蛋白的表达纯化

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  [摘要]目的:克隆doc一1基因、构建原核表达载体并纯化出其重组蛋白。方法:从人胎脑组织中提取总rna,经逆转录-聚合酶链式反应(rt—pcr)扩增doc-1的cds序列,再通过基因重组技术将该基因片段依次克隆到pmd18-t和pgex-4t-1载体中,构建融合表达载体pgex-4t-1-doc-1,经酶切、测序鉴定后,用该重组质粒转化e.colibl21,用iptg诱导表达,olutathionesepharose 4b柱亲和层析纯化重组蛋白。结果:电泳证实rt-pcr扩增产物与预期目的基因doc-1长度一致,测序结果与genbank公布的doc-1基因序列完全一致,ip ……阅读全文

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